Optimierung der Produktion und Aufarbeitung von Glucose-6-phosphat Dehydrogenase und Hexokinase aus Bäckerhefe

Inhaltsangabe: Einleitung: Das Ziel dieser Diplomarbeit war es, ein Verfahren zur Herstellung der Enzyme Glucose-6-phosphat Dehydrogenase (G6P-DH) und Hexokinase (HK) aus B?ckerhefe (Saccharomyces cerevisiae) f?r die Anwendung zur Glucoseanalytik innerhalb eines Studentenpraktikums zu optimieren. G6P-DH und HK werden z.B. zur quantitativen Glucosekonzentrationsbestimmung in Kulturbr?hen oder zur Ermittlung des Blutzuckergehaltes und des Zuckergehaltes in Lebensmitteln eingesetzt. In dem Studentenpraktikum sollen G6P-DH und HK von den Studierenden selbst?ndig aus Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) gewonnen werden, um damit den Einkauf dieser Enzyme einzusparen. Die isolierte G6P-DH und HK soll dann zur Glukosekonzentrationsbestimmung in der im folgenden Praktikum benutzten Kulturbr?he eingesetzt werden. Die Messung der Glucosekonzentration einer Zellkultur ist notwendig, um den Substratverbrauch und damit den Substratausbeutekoeffizienten zu ermitteln. Weiterhin soll den Studierenden ein Vefahren zur Herstellung und Aufarbeitung von Enzymen im Rahmen ihrer Ausbildung vermittelt werden. F?r das Praktikum werden Ger?te verwendet, die der Fachhochschule Jena bereits zur Verf?gung standen. Zu beachten war, dass bei der Optimierung Aufwand und Kosten der Versuche in einem vern?nftigen Verh?ltnis zu dem Nutzen in Beziehung standen. Um das Verfahren zu optimieren wurde es zun?chst mit aus der Literatur oder empirisch gewonnenen Parametern durchgef?hrt. Dann wurde versucht den oder die „bottlenecks" zu beseitigen. Hierzu wurden nacheinander die Stellen, die den gr? ten Verlust an Enzym verursachten, optimiert. Dabei durfte jedoch das ideale Kosten-Nutzen-Verh?ltnis nicht aus den Augen verloren werden. Vor Beginn der eigentlichen Versuche wurden die Optimierungsrandbedingungen festgelegt. Dies waren zum einen die Anzahl der Versuche, die so niedrig wie m?glich gehalten werden sollten, um ein geringes Kosten-Nutzen-Verh?ltnis zu erreichen. Zum anderen spielt die Da

Author: Werner Höra

Publisher: Diplom.de

Publication Date: Jul 03, 2002

Number of Pages: 194 pages

Binding: Paperback or Softback

ISBN-10: 383865580X

ISBN-13: 9783838655802